抗his抗体用什么二抗（抗his标签抗体）
本篇文章给大家谈谈抗his抗体用什么二抗，以及抗his标签抗体对应的知识点，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。
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蛋白marker每条带多少ng
DNA Ladder Marker由DNA片段250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp、1500 bp、2250 bp、3000 bp、4500 bp组成，共8条带。
marker都是有浓度的，可以根据对比marker和DNA条带的亮度大体估计。建议DNA的浓度用测A260的方法去测，这个方法是最普遍应用的。
可以选择博凌科为的 AL2000 DNA Marker 为已含有1×loading Buffer的DNA溶液，可取5μl直接电泳，使用十分方便。AL2000 DNA Marker 由DNA片段2000bp、1000bp、750bp、500bp、250bp以及100bp构成，每条带的DNA量约为50ng。
在低分子量蛋白标准这里还包括可特别小的蛋白标准，比如30kD以下蛋白或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错，另外提醒一句，特别小的蛋白Marker条带如果要显色好，上样一定要上足够的量哦。
Marker I 是由单独制备的PCR 产物混合而成，共有6 条DNA 片段，已加入上样缓冲液，可直接电泳，每次上样6 μl，为便于电泳后观察，400 bp 条带最亮，每次用量约为100 ng，其它条带的DNA 每次用量约为50 ng。
包涵体纯化蛋白复性案例分析——钟鼎生物
上述收集的蛋白溶液加入透析袋中，使用20 mM Tris-HCl，0.15 M NaCl，pH0进行透析过夜； 进行12% SDS-PAGE分析， 结果如Fig.2所示。
常见的纯化方法是将包涵体分离出来用尿素重新溶解包涵体蛋白后再复性蛋白质。
① 包涵体就是蛋白的变性聚集后的产物，6M盐酸胍及8M尿素是作为溶解包涵体的溶剂。② 复性的过程是逐步去除盐酸胍或者尿素，从而使得蛋白天然构象逐步形成。
柱上复性：是最近研究较多并成功的在生产中应用的一种复性方法，包涵体蛋白变性后，在色谱柱上复性，大致可分成疏水柱复性及凝胶柱复性两类。
常见蛋白标签-6xHis标签
xHis 标签，也称为多组氨酸标签（polyhistidine ），His6标签或hexa组氨酸标签，这是一种在转染的细胞中目标蛋白的C端或N端上由至少6个组氨酸残基链接上所组成的氨基酸序列。
his标签蛋白就是：六个组氨酸。一般存在于重组蛋白氮端或碳端，便于纯化该重组蛋白，组氨酸可以特异性的结合镍离子，带有组氨酸标签的重组蛋白可以被镍柱吸附，从而达到纯化的目的。
His标签单抗又叫6×His标签单抗，或6×His单克隆抗体，用小鼠制备，HIS可被镍柱吸附，用于纯化重组蛋白。
xHis可插入在目的蛋白的C末端或N末端，用于对重组蛋白进行分离纯化。His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化，前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用。
蛋白质制备时可以使用多种类型的标签进行融合，常见的有：His 标签：His 标签是最常用的融合标签之一。这个标签通常在蛋白质的N-或C-端附加，通过其亲和性与金属离子结合，从而实现对融合蛋白的纯化和富集。
杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达服务案例—钟鼎生物
1、根据瞬时表达的定义，即瞬时转染后的初期，质粒或DNA片段是游离在细胞中的，能够进行表达，成为瞬时转染表达。而杆状病毒表达系统中的外源蛋白表达是随着杆状病毒在昆虫细胞中复制扩增的过程中表达的。
2、有的表达系统中还包括了协助载体进入宿主的辅助成分。比如昆虫-杆状病毒表达体系中的杆状病毒。 编辑本段蛋白表达系统分类及优劣分析 原核蛋白表达系统既是最常用的表达系统，也是最经济实惠的蛋白表达系统。
3、故采用真核表达系统。通过位点特异的转座可方便地将外源基因插入到病毒穿梭载体上，然后提取含有外源基因的重组DNA，将其转染昆虫细胞即可获得含有外源基因的重组病毒用于表达目的蛋白。产物的表达、分离和纯化。
4、昆虫杆状病毒表达载体是全世界范围内各实验室广泛使用另一种真核表达载体。昆虫杆状病毒是最大的环状单一双链DNA 病毒，其基因组在90～230 kb 之间，具有编码上百种蛋白质的能力。
5、病毒杀虫剂 寄生于农业害虫的病毒已发现约 200种，有些已被开发作为病毒杀虫剂。其中大多数属于杆状病毒的核多角体病毒，少数是颗粒体病毒。
6、里面裹着DNA或者RNA，甚至单独的蛋白质和单独的DNA、RNA游离，这些散落的游离的分子，有一些个别的和大生物细胞膜有亲和性，大生物细胞通过吞噬作用使其进入细胞，其DNA、RNA得以表达，然后通过进化形成现在成熟的病毒。
如何选择二抗
一抗选择实验类型的种属，二抗选择种属来源。一抗确定你的实验类型，Elisa，WB，IHC，ICC，还是FACS，确定实验样本的种属，Human，Mouse，还是Rat。
二抗选择 （1）种属来源。主要根据一抗种属来源而决定二抗来源，如一抗是小鼠来源，那二抗就买抗小鼠的即可（羊、兔等均可）。（2）标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。
如何选择二抗？通常情况下，某一特定的实验中可能同时有几种二抗可供选择，如何能选择到适合该实验的二抗，需要综合以下几个方面进行考虑： (1)一抗的种属来源 根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。
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